我的胎牛血清中含有絮状沉淀,它是什么?
血清中沉淀的出现有许多原因,最常见的原因是血清中的脂蛋白发生了变性。而存在血清里的血纤维蛋白在解冻后是造成沉淀的主要原因之一。但这些絮状沉淀并不影响血清本身的质量,如果您要去除这些沉淀,可将血清分装至无菌离心管中,以400g稍稍离心,上清液即可加入培养基内一起过滤。
如何保存血清?
血清应该保存在-5℃至-20℃条件下,存放在4℃条件下时请勿超过一个月。若您一次无法用完一瓶,建议您无菌分装后再放回冷冻。
如何解冻血清?
血清从冷冻冰箱取出后,建议您先置于2-8℃冰箱过夜解冻,然后再在室温下使之全融。解冻过程中需要定期的摇晃混合均匀。一旦解冻请立即使用。
我如何知道我的细胞是否需要热灭活的血清?
大多数昆虫细胞系和胚胎干细胞系都需要热灭活血清。您也可以咨询细胞提供厂商获取相应细胞培养的要求。
为什么要热灭活血清?有必要做热灭活吗?
解热可以灭活补体系统。在免疫学研究,培养ES细胞、昆虫细胞和平滑肌细胞时建议使用热灭活血清。而实验也证明对大多数的细胞而言,热灭活是不必要的。经此处理的血清对细胞的生长只有微小的促进,或完全没有作用,但高温处理会影响血清的品质,甚至造成细胞生长速率的降低。热灭活过的血清,沉淀物会显著增多,这些沉淀在倒置显微镜下观察像是“小黑点”,让研究者误以为是血清遭到污染,而血清放在37°条件下又会使沉淀物增多,使研究者误以为是微生物的增殖。因此,若非必须,建议您不要做热处理!如此不但节省您的宝贵时间,更确保血清的质量!
如果我拿到的血清已经部分解冻,还可以使用吗?
所有的血清在运输过程中都保存在干冰里,您应该得到冰冻的产品。如果血清部分解冻可以继续使用,但至少三分之二还应该处于冰冻状态。
我应如何保存抗体?
抗体储存容器应由不吸附蛋白质的材料制成,常用的有聚丙烯,聚碳酸酯和硼硅酸玻璃。如储存的抗体中蛋白浓度很低(10-100Mg/L),就应另加隔离蛋白以减少容器对抗体蛋白的吸附,隔离蛋白常用0.1%-1.0%的牛血清白蛋白。
绝大多数已稀释的抗体应存在4℃-8℃条件下,以免冻融对抗体蛋白产生有害效应。抗体原液和已分离的免疫球蛋白组分应保存于-20℃条件下,并避免反复冻融。冷冻的抗体溶液应置于室温中缓慢地解冻,应绝对避免用高温快速解冻。
被细菌污染的抗体常会出现假阳性结果,应将污染的抗体溶液及其他试剂弃之。为防止细菌污染,可于抗体溶液中加入0.01%叠氮钠。抗体经真空冷冻干燥后置-20℃以下可保存3-5年。
保存稀释后的单抗应加入0.1%叠氮钠浓度。大多数稀释抗体可进行冷冻保存,少数抗体可能会丢失抗原活性。大多数单抗,只要蛋白浓度适当,可在4℃下保存数月。
我应如何选择同型对照?
同型对照用来确认一抗结合是特异性的,而不是非特异性Fc受体结合或者其他蛋白质相互作用的结果。同型对照抗体应当同一抗的宿主物种、同型和偶联物相匹配。例如,如果一抗为 FITC 偶联的小鼠 IgG1,则需要选择 FITC 偶联的小鼠 IgG1 同型对照。
什么是CD抗原?
CD,即分化丛(clusters of differentiation)。第Ⅳ届国际免疫学会议命名委员会(1983,京都),根据T细胞表面的分化抗原存在丛集现象,将这种抗原命名为CD抗原。CD抗原不仅存在于T细胞,也存在于B细胞,巨噬细胞等。
单克隆抗体(McAb)和常规免疫血清抗体的特性比较
项目 | 常规免疫血清抗体 | McAb |
抗体产生细胞 | 多克隆性 | 单克隆性 |
抗体的结合力 | 特异性识别多种抗原决定簇 | 特异性识别单一抗原决定簇 |
免疫球蛋白类别及亚类 | 不均一性,质地混杂 | 同一类属,质地纯一 |
特异性与亲合力 | 批与批之间不同 | 特异性高,抗体均一 |
有效抗体含量 | 0.01~0.1mg/ml(小鼠腹水) | 0.5~5.0mg/ml(小鼠腹水) 0.5~10.0μg/ml(培养物上清液) |
用于常规免疫学实验 | 可用 | 单抗组合应用 |
抗原抗体形成格子结构(沉淀反应) | 容易形成 | 一般难形成 |
抗原抗体反应 | 抗体混杂,形成2分子反应困难,不可逆 | 可形成2分子反应,可逆 |
前后两次购买的双抗溶液颜色上有明显差异,是产品质量问题吗?
双抗颜色差异主要是原料批次差异造成的,颜色差异不会影响产品的使用。国外也专门就这一问题出了一份说明文件,如有需要可联系我方销售索取。
怎么分离和纯化核酸?
核酸存在于多种细胞,如病毒、细菌、寄生虫、动植物细胞;多种标本中,如血液、组织、唾液、尿液等其它来源的标本。因此分离方法复杂而多样。又因各种DNA、RNA的丰度差异,各种分析方法对核酸的纯度与量的要求有差异,因此在实验前应对采用的方法有所了解和选择。总的说来核酸的分离与纯化是在溶解细胞的基础上,利用苯酚等有机溶剂抽提(核酸溶于缓冲液,即水相),分离,纯化;乙醇、丙酮等有机溶剂沉淀,收获。溶解细胞的方法因标本不同而不同,有用SDS加NaOH,有用蛋白酶,有的用超声波破碎等方法,苯酚提取主要使蛋白质变性沉淀于有机相,而核酸保留在水相,达到分离核酸的目的。实验上生物标本中含量最多的就是蛋白质。为了除去分离过程中残留的有机溶剂,常用的方法是加冷乙醇和盐沉淀核酸,通过离心回收核酸,然后用70%-80%乙醇洗涤沉淀,除去多余的盐,以免影响核酸溶解和抑制后续步骤的酶促反应。为了得到纯的核酸可用蛋白酶除去蛋白,用RNA酶除去RNA,得到纯的DNA,用DNA酶除去DNA而获得RNA。目前开发了许多商品化的核酸分离柱,可简单、快速地分离得到纯度很高的DNA或RNA。其分离原理有的利用核酸的分子量差异,有的利用需分离核酸的特点与其特异性结合达到分离、回收的目的。
购买的含酚红胰酶不同批次间颜色有差异或产品部分变黄,是质量问题吗,还可继续使用吗?
颜色发黄可能是冻存过程中酚红分布不均导致的,一般来说不会影响产品性能。 产品在冻存的过程中是缓慢降温,由于不同的瓶子之间降温的速度不完全一致,而瓶中的不同成分可以凝固时的温度也不同,因此导致了不同的颜色出现,也是不会影响使用的。
是否有产品的合格证书或质检证书?
根据产品的货号和批号,每批产品都有对应的COA质检单,如有需要,可联系对应销售人员获取产品的COA。
产品的保质期是多久?
不同产品的保质期或效期不同,如有需要,请联系我方查询。
订购产品后,我如何获取我的发票?
在您收货后,我们的财务人员会为您开具电子发票。